Phương pháp đếm các tê bào máu thủ công

Phương pháp này hiện còn được dùng phổ biến ờ nhiều bệnh viện.

- Lấy máu: nên lấy máu:

. Xa giờ ăn, bệnh nhân khồng vận động để tránh trường hợp tăng bạch cầu sinh lý sau bữa ăn và do vận độngnhiều.

. Vào một giờ nhất định để so sánh với các lần thử trước cho chính xác.

. Có thể lấy máu chỗ nào cũng được nhưng thông thường nên lấy máu các mao mạch ở đầu ngón tay hoặc lấy ở dái tai đối với trẻ con. Sát khuẩn cẩn thận chỗ định châm bằng cồn, lau khô bằng bông sạch. Nếu định châm ở đầu ngón tay, trưóc khi đó nên cử động bàn tay vài cái hoặc vuốt nhẹ nhàng cho máu dồn ra đẩu ngốn.

Dùng kim châm dã tiệt khuẩn. Chọc đủ sâu để máu ra không phải bóp tay. Bỏ giọt máu đầu tiên, lấy giọt máu thứ hai. . Nếu bóp mạnh ngón tay, bạch huyết ở các tổ chức cớ tftể hòa lẫn nhau và làm loãng máu, sai kết quả.

- Pha loãng: các tế bào máu có trong máu với một số  lượng vô cùng lớn, nếu không pha loãỉiiỉ máu đẽ rời tùĩiL’ cái một thì khỏne thể đêm được. Dune dịch đẽ pha lo,Hit: thường dùng:

. Hổng cầu: thường dùng các d u n g dịch Ha y cm, M arcano, Gowers.

Dung dịch Hayem gốm có natri sulfat, natri chlorur, thủy ngán II chlorur và nước cất.

Dung dịch Marcano gồm có natri sulfat, formol và nước cất. Dung dịch Gowers gồm có natri sulfat, acid acetic và nước cất.

. Bạch cầu: dung dịch Lazarus gồm có acid acetic, xanh methylen và nước cất. Dung dịch Lazarus có tác dụng làm tan hồng cầu nên trên kính hiển vi dễ xem hơn. Phòng xét nghiệm dùng ống hút Potain để pha loãng máu; có 2 loại riêng dùng cho bạch cầu hoặc hổng cầu:

- Ống hút hổng cẩu, cột hút nhỏ, bầu trộn lớn, trong có hạt thủy tinli xanh hoặc đỏ để trộn máu, trên ống hút có khắc các sô' 1, 0,5 và 101: độ pha loãng 1/100 hoặc 1/200.

- ố n g hút bạch cầu, cột hút to, bầu trộn nhỏ, hạt thủy tinh màu trăng. Trên ống hút cũng khắc số 1, 0,5 nhưng  vạch trẽn cùng là 11: độ pha loãng 1/10 hoặc 1/ 2 0 . Mau se được hát vàọ ống Potain tới nấc 1 hoặc 0,5 tùy theo độ pha loặng định trước. Sau đó hút dung dicií Marcano... lên tới nấc 101 với ổng hút hồng cẩu va dung dịch Lazarus lên tới nấc 1 ĩ dối với ống htìt bạch cẩu Phải làm nhạnh kẻo đông máu, lẳc th để có đô phân tán đều.

- Đếm rúc ỉ ế háo máu: Các phòng xét nghiệm dùng huyêt cầu kê dê đêm tê bào máu. Có nhiểu loại huyết cầu kế: Goriaev, Agasse-Lafont, Fiessinger, Thomas, Levy, Neubauer, Malassez... Các huyết cáu kế là những phiến kính dày, giữa có một khoảng õm, trong kẻ nhiều đường ngang dọc phân chia thành những ô vuông nhỏ. Huyết cầu kế Neubauer có 25 ô vuông to, mỗi ô có vuông diện tích 0,04 mm2, thể tích 1/250 mm3 và chia làm 16 ô nhỏ. Thể tích của cả 25 ô vuông to là

I /10 mm3 và mỗi ô nhỏ là 1/4000 mm3. Huyết cầu kế Goriaev cũng tương tự như vậy nhưng sắp xếp vị trí các hình vuông có khác nhau.

Bỏ mấy giọt đầu trong ống hút chỉ lấy những giọt trong bầu trộn, nhỏ vào huyết cầu kế rói áp một lá kính lên, sau đó đưa lên kính hiển vi đếm.

Nguyên tấc đếm:

- Đếm từng ô nhỏ một, tránh đếm đi đếm lại những hồng cầu nằm ở giữa hai ô.

- Đếm nhiều ô rồi lấy số trung bình (thường phải lấy tới 80 ô nhỏ tức 5 ô vuông to ờ các góc).

. Nhân với số lượng ô có trong 1 mm’ (= 1 Jỉl) máu rồi nhãn với độ pha loãng, ta cố số lượng hổng cẩu trong 1 }il máu.

- Đối với bạch cầu cũng tiến hành như vây nhưng đếm ờ những ô to (nếu dùng huyết cẩu kế Neubauer: đếm ở bốn khu vực góc) vì số bạch câu có tỷ lệ rất ít so với hồng cẩu. Chú ý: có nhiều nguyên nhân làm cho đếm tế bào máu khó chínb xác:

- Do dụng cụ: dụng cu khi sản xuất thiếu chính xác, dụng cụ dùng láu bị mòn. hoặc rửa không kỹ bi vây hãn nhiêu

- Do kỹ thuật : khi lấy máu lại bóp ngón tay nhi éu iàm bạch huyết lẫn vào máu; lấy máu khỏng đu lương quy đinh, lắc không đéu...

- Do kỹ thuật vicn: quen hay không quen làm, moi mat khi làm nhiều quá, phương pháp đêm không thòng nhât. Nói chung, với những lý do trên, sai sô ± 3% có thê COI là thấp nhất.